A proba de endotoxinas bacterianas (BET) realízase na maioría dos laboratorios modernos en condicións controladas como o factor importante para evitar interferencias.
Axeitadatécnica asépticaé importante á hora de preparar e diluír patróns e manipular mostras.Batapracticar fóra do equipo de protección persoal normal do laboratorio (EPI) os requisitos non son unha preocupación a non ser que o produto en proba esixa consideracións específicas de seguridade dos analistas debido á súa toxicidade ou infecciosidade.Luvasdebe estar libre de TALC, xa que o TALC pode conter niveis significativos de endotoxinas.Lectores de placas, baños de auga e bloques de calor secousado para a incubación da mostra debe estar nun banco de laboratorio lonxe de condutos de calefacción, ventilación e aire acondicionado (HVAC), vibracións significativas e tráfico de laboratorio que poidan afectar os resultados das probas.Tempos e condicións de retención da mostradebe determinarse e documentarse posteriormente, se é necesario, para garantir que se poidan xerar resultados precisos das probas no tempo cualificado.
Por exemplo, se o laboratorio recibe unha mostra de auga para inxección (WFI) ou en proceso, debe ser refrixerada ou pode permanecer a temperatura ambiente e durante canto tempo?Antes da proba, recoméndase mesturar adecuadamente o ou os recipientes de mostra primario antes de retirar as alícuotas da proba para a proba directa ou a posterior dilución.
Bioendo Bacterial Endotoxin Test, os experimentos están incluídosmétodo de coágulo de xelproba de endotoxinas eEnsaio cuantitativo de endotoxinas, método de coágulo de xel ensaio de proba de endotoxinas é a detección cualitativa de endotoxinas, estes experimentos requiren que os consumibles son procesamento de despiroxenación, como tubos de reacción sen endotoxinas, tubos de dilución e puntas libres de piróxenos;A detección cuantitativa de endotoxinas ten unha proba de endotoxinas cromoxénicas cinéticas, unha proba de endotoxinas turbidimétricas cinéticas, estes experimentos requiren que os consumibles teñan que cumprir o nivel superior de endotoxinas menos de0,005 EU/ml(0,001EU/ml), como tubos libres de endotoxinas, puntas libres de piróxenos e microplacas libres de piróxenos, incluso depósitos libres de piróxenos.Por certo, se o tratamento de mostras, o recipiente ten que ser a botella de mostra libre de endotoxinas.
Nas probas de endotoxinas, a interferencia pode xurdir de diversas fontes, como os compoñentes da matriz da mostra, os reactivos de proba ou os equipos.
Para evitar interferencias dos experimentos, pódense tomar as seguintes medidas:
1. Preparación da mostra: a preparación axeitada da mostra é esencial para unha proba de endotoxinas precisa.
A matriz da mostra debe ser probada e optimizada a fondo para garantir a compatibilidade co ensaio de endotoxinas.
En particular, as substancias interferentes como lípidos e proteínas deben eliminarse ou minimizarse mediante técnicas adecuadas como a filtración ou a centrifugación.
2. Controis positivos e negativos: é esencial incluír controis positivos e negativos no ensaio para controlar as interferencias.
Os controis positivos confirman a funcionalidade da proba, mentres que os controis negativos detectan calquera contaminación ou interferencia dos compoñentes do ensaio.
3. Control de calidade: o control de calidade debe realizarse en todos os reactivos, equipos e auga utilizados no ensaio.
Isto garante que os reactivos estean libres de contaminación por endotoxinas e funcionen correctamente.
4. Normalización: o ensaio debe estar estandarizado para garantir que todos os resultados sexan comparables e reproducibles.
Isto implica o uso dunha curva estándar para calibrar o ensaio e o uso de técnicas estandarizadas para a preparación, incubación e detección de mostras.
5. Validación: o ensaio debe ser validado para garantir que é específico, sensible e fiable.
Isto implica probar unha serie de mostras, incluídas as que se sabe que conteñen endotoxinas, para determinar a exactitude e precisión do ensaio.
Seguindo estas medidas, pódese minimizar a interferencia e conseguirse probas de endotoxinas precisas.
Hora de publicación: Dec-01-2022
